目的 明确急性臭氧袒露后大鼠肺泡灌洗液泉源的外泌体中细小 RNA(microRNA,miRNA)表达谱 的转变,并剖析其与肺损伤的潜在关系 。
要领 将成年雄性 Wistar 大鼠放入气体染毒舱内划分袒露于 0、0. 5 和 2 ppm 臭氧 6 h 。 实验竣事后 24 h 麻醉大鼠,网络肺泡灌洗液并提取外泌体 。 接纳 miRNA-seq 手艺检测外泌体中 差别表达的 miRNA,使用 miRDB 数据库对组间差别表达 Top 10 miRNA 举行靶基因展望,并对靶基因举行 Gene Ontology 功效富集和 KEGG Pathway 剖析 。 使用 qRT-PCR 要领对表达品貌较高且组内均一性较好的差别表达 miRNA 举行验证 。
效果 与 0 ppm 组相比,0. 5 ppm 组大鼠肺泡灌洗液中外泌体 miRNA 有 8 个上调、55 个下调,而 2 ppm 组中有 32 个上调、61 个下调 。 与 0. 5 ppm 组相比,2 ppm 组大鼠肺泡灌洗液中外泌体 miRNA 有 90 个上调、 74 个下调 。 差别表达 Top 10 miRNA 的靶基因主要加入调控 DNA 团结、杂环化合物团结和影响转录等方面,并与 癌症、MAPK、PIK3-AKT、TNF、ErbB、线粒体自噬和 FoxO 等信号通路亲近相关 。 qRT-PCR 效果批注测序效果基本可 靠 。
结论 急性臭氧袒露可导致大鼠肺泡灌洗液中外泌体 miRNA 表达谱爆发转变,差别 miRNA 可能加入了臭氧 袒露所致的肺组织炎症、肺损伤等病理历程 。
阅读原文：急性臭氧袒露对大鼠肺泡灌洗液中外泌体miRNA表达谱的影响.pdf
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