目的 建设双光子显微镜下可视化胶质瘤、壁细胞和血管的活体自觉荧光的基因小鼠模子并举行 评价 。
要领 以 ＰＤＧＦＲβ?Ｃｒｅ ＋ ／ － ：Ｒｏｓａ２６?ｔｄＴｏｍａｔｏ ＋ ／ －基因工程小鼠为视察壁细胞和血管结构的载体 ，接种 ＧＬ２６１? ＣＦＰ 小鼠胶质瘤细胞并对颅骨举行透明化 ，通过双光子显微镜动态跟踪视察胶质瘤增殖侵袭历程中血管与壁细胞 的动态转变 。
效果 通过基因判断证实 ＰＤＧＦＲβ?Ｃｒｅ ＋ ／ － ：Ｒｏｓａ２６?ｔｄＴｏｍａｔｏ ＋ ／ － 基因工程小鼠乐成繁育 。 比照 Ｃ５７ＢＬ／ ６ 小鼠 ，基因工程小鼠的形态外观和滋生等无显著性差别 ，组织苏木素?伊红（ＨＥ）染色切片剖析显示脏器 发育无异常 。 Ｔａｍｏｘｉｆｅｎ 诱导下基因工程小鼠的 Ｃｒｅ 重组酶活性至第 ７ 天作用完全 。 接种 ＧＬ２６１?ＣＦＰ 后视察到胶 质瘤增殖侵袭的动态历程及肿瘤内血管形态结构杂乱、游离壁细胞增多 。
结论 乐成构建了荧光可视化壁细胞的 基因工程小鼠 ，划分使用异硫氰酸荧光素?葡聚糖标记血管和青色荧光标记肿瘤细胞 ，使用玻璃圆片与牢靠环替换 小鼠颅骨 ，实现了活体状态下恒久稳固地动态跟踪小鼠接种脑肿瘤后血管及血管支持细胞的形态结构转变 ，为研 究脑胶质瘤提供了病理可视化的动物模子 。
阅读原文：双光子显微镜手艺下胶质瘤?壁细胞在体多荧光示踪小鼠模子的建设及应用.pdf
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