一、美国对实验动物饲料标准的研究
美国科学院的天下理事会(National Research Council,NRC)宣布了一系列动物饲料标准,简称NRC标准,普遍涉及啮齿类动物、反刍动物等种种动物,在这些动物饲料标准制订的推动下,一些学会凭证实验动物的特点以及自身研究领域对实验动物饲料的特殊要求划分制订了知足NRC标准但要求更为严酷的实验动物饲料标准,并随着NRC标准的升级而一直优化调解。虽然在历史上,对实验动物饲料的研究开展较早的是日本,可是美国在这方面成为后起之秀,所制订的标准成为目今最完整、最有权威和最具代表性的实验动物饲料营养需要标准。
二、美国实验动物饲料标准:NRC标准
1962年宣布了实验动物营养需要量的第一版,包括大鼠、小鼠、豚鼠、地鼠、猴、猫。1972年宣布了第二版,对第一版举行了升级,1978年宣布了第三版,除了对大鼠、小鼠、豚鼠、地鼠、沙鼠、田鼠的营养需要量外还增添了鱼的营养需要量。1995年宣布了第四版,对大鼠、小鼠、豚鼠、地鼠、沙鼠、田鼠的营养需要量再次修订升级,成为目今使用的标准。因此,NRC对差别实验动物制订的目今使用标准如下:
?大鼠(Rats):1995年(第四版)。
?小鼠(Mouse):1995年(第四版)。
?豚鼠(Guinea Pig):1995年(第四版)。
?地鼠(Hamster):1995年(第四版)。
?沙鼠(Gerbil):1995年(第四版)。
?田鼠(Vole):1995年(第四版)。
?猴(Monkey):1962年(第四版)。
?猫(Cats):1962年(第四版)。
?鱼(Fishs):1978年(第三版)。
在上述实验动物中,猫和猴的营养需要量标准在宣布后NRC揭晓了通用标准,因此,在使用时还应当参考:
?猫(Cats):1986年公布。
?猿猴(nonhuman primates):1978年揭晓。
至今尚未宣布其它实验动物的营养需要量标准,因此,可参考NRC公布的响应动物的饲料通用标准。这些标准如下:
?兔(rabbit):1977年公布。
?冷水鱼(Cold Water Fishes):1981年揭晓。
?温水鱼(Warm Water Fishes):1981年揭晓。
?山羊(Goats):1981年公布,2007年升级。
?绵羊(Sheeps):1985年公布,2007年升级。
?鹿(Cervids):2007年宣布。
?貂(Mink):1982年公布。
?狐狸(Foxes):1982年公布。
?甲壳类(Shellfishes):1983年公布。
?肉牛(Beef Cattle):1984年公布。
?奶牛(Dairy Cattle):1989年公布。
?犬(Dogs):1985年公布。
?猪(Swine):1988年公布。
?马(Horses):1989年公布。
?家禽(Poultry):1994年公布。
三、实验动物配合饲料-NIH标准
在第一章中已经叙述了实验动物饲料成份若是控制不当,即可影响动物的心理状态,又可影响实验干预因子的作用,在第二章中还详细叙述了实验动物饲料标准的原则,其中包括了对证料的选择性以及营养素需要量确定等方面特殊性。理想地,所有实验动物都应该使用纯化饲料。然而,若是有选择性地确定某几种日粮,并划定配合组成和含量(浓度),所配制的配合饲料仍然可以应用于实验动物,因此,NIH在制订的实验动物饲料标准中,着重于给出牢靠的标准配方,即所谓开放性配方,这种要领能够有用控制实验动物使用的饲料质量和稳固性,并有利于降低生产本钱,然而,由于日粮成份和稳固性差,因此,严酷说来不适用于实验动物,因此,使用规模很是有限,这一点读者应当特殊注重。NIH制订的有关实验动物配合饲料标准及其开放性配方如下:
?大鼠和小鼠饲料:NIH-07,NSN-8710-00-509-7915
?大鼠和小鼠饲料:(18%粗卵白,蒸气灭菌),NIH-31,NSN- 8710-01-005-8438
?大鼠和小鼠饲料:(9%脂肪,蒸气灭菌),NIH-36,NSN-8710-00-L63-8761
?大鼠和小鼠饲料:(10%脂肪,放射灭菌法),NIH-40
?豚鼠饲料:NIH-34M,NSN-8710-00-900-1230
?啮齿类动物饲料:(18%粗卵白和5%粗脂肪,放射灭菌法),NIH-41
?兔饲料:(蒸气灭菌),NIH-32,NSN-8710-01-005-8439
?兔饲料:NIH-09,NSN-8710-00-509-7941
?猪饲料:NIH-98
?猪:NIH-2004,NIH-11-142g
?狗饲料:(干饲料),NSN-8710-00-507-5835
?猿猴类饲料:(膨化饲料),NIH-11-152f,NSN-8710-00-216-6258
?猿猴饲料:(20% protein, high fiber), NSN-8710-00-L63-7604
?有蹄类动物饲料。
四、啮齿动物纯化饲料-AIN标准
上面已经提到,NIH虽然制订了实验动物的配合饲料标准,但由于质料使用日粮,若干影响因素不可扫除,因此,标准的制订中仍然只能类似于畜牧饲料标准即对一些指标和营养素含量使用“大于号”或“小于号”体现,仍然没有脱离畜牧饲料的质量控制差的误差,因此,在应用中有很大的局限性。
啮齿类小动物在众多研究领域常用的也是实验研究中使用数目最多的实验动物。美国营养学会(American Institute of Nutrition,AIN)在1976年公布了啮齿类实验动物纯化饲料标准,即AIN-76标准,在短短不到一年的使用期中发明几个营养素偏低的问题,因此,公布后的次年连忙提出修改,成为AIN-76A,直到1993年,在对前17年使用时代的现实视察并团结动物营养学和毒理学方面的研究希望,进一步对标准优化,形成了1993年公布的AIN-93标准。在该标准宣布后,1995年NRC标准第四版公布,其中几项指标高于AIN-93,为知足NRC标准,泛起了"modified AIN-93"。然而,不少学者以为没有不要modified,由于NRC标准中这几项指标偏高或至少AIN-93中已经知足动物的需要。从而泛起了有的研究者使用AIN-93,有些研究者使用modified。
AIN标准分为G型和M型。G型就是我们常说的(AIN93G饲料),M型就是我们常说的(AIN93M饲料)。AIN93G饲料用于动物生长发育、妊娠和哺乳时代,而AIN93M饲料用于动物维持需要。AIN标准设计的原则是,
(1)应用纯化成份配制,即纯化饲料;
(2)知足甚至凌驾NRC设置的动物营养需要量;
(3)质料泉源稳固、可靠,价钱可接受;
(4)成份坚持一致性和可复制性;
(5)适用于普遍的研究规模,即无论出于任何研究目的,均可通过改变配方组成抵达研究者的目的。
由于AIN标准属于纯化饲料标准,其标准设计的原则具有较强的科学性、应用性和可行性,易于获得质量稳固、可靠的饲料产品,这关于营养学研究而言险些是国际上唯一的平台,而对其它所有研究领域提供了精度最高的平台,因此,AIN标准从公布起就已成为国际上普遍吸收和普遍接纳的实验动物饲料标准,毫无疑问,AIN-93是目今最为理想的啮齿类实验动物饲料标准。
五、啮齿动物配合饲料-NTP标准
与营养学研究类似,毒理学实验研究对实验动物饲料的要求较高,甚至更高,这是由于毒理学不允许使用含有任何对实验动物有潜在毒性的物质,其中也包括营养素过载的毒性问题,因此,美国建设的国家毒理妄想(the National Toxicology Program,NTP)对实验动物饲料起劲开展了研究。NTP建设于1978年,从1980年最先将NIH-07标准选作毒理学和致癌性研究的啮齿动物饲料。在研究中发明,将NIH-07配方中的卵白含量降低而脂肪和纤维素含量提高,在恒久喂饲F334大鼠(Fischer–344)后可降低慢性疾病的严重性、镌汰或延缓自觉肿瘤的爆发,基于这些研究视察,团结NIH-07标准、AIN-95标准、NRC-95标准,重新制订了NTP-2000标准饲料配方,喂饲大鼠13周的试验中视察到大鼠对饲料摄入量增添、饮水量镌汰,血清胆固醇、碱性磷酸酶、5‘核苷酸酶升高,而血清甘油三酯降低,内脏器官重量也爆发改变,如肝脏、肾脏、肾上腺重量降低,阻止了肾脏钙化征象的爆发,降低了肾病和心肌病的严重性。现实上,NTP-2000的降生就是配合饲料自己可导致实验研究效果不可靠的佐证。