目的 视察和剖析斑马鱼体肾的微细结构,并对其渗透的外泌体举行疏散判断。
要领 应用光学显微镜和 电子显微镜手艺系统视察斑马鱼体肾的显微结构和超微结构,用纳米颗粒跟踪剖析 (nanoparticle tracking analysis,NTA) 手艺检测外泌体粒径巨细。
效果 斑马鱼体肾紧贴并平行于脊椎,肾单位由肾小管和肾小体组成, 其中肾小管可细分为近曲小管、远曲小管及颈段 3 种类型,肾小体由肾小球和肾小囊组成;经高碘酸-希夫 (periodic acid-Schiff,PAS) 染色后,可见近曲小管富含糖原颗粒,其游离面有显着的刷状缘结构。透射电子显微 镜下,在肾小管的管腔视察到外泌体漫衍,上皮细胞游离面的胞质有少量多囊泡体和大宗的晚期内在体漫衍,肾小 管的顶端和肾小球足细胞中亦视察到少量多囊泡体漫衍。通过CD9、CD63和TSG101免疫组织化学和免疫荧光检测 显示,多囊泡体及其外泌体在肾小管管腔的游离面高表达,在肾小体和管腔内表达较弱。NTA和透射电子显微镜观 察效果显示,疏散获得的斑马鱼体肾外泌体呈茶托状,粒径众数为144.4 nm,切合外泌体形态和直径巨细特征。
结论 斑马鱼体肾具有哺乳动物肾脏的典范结构,为体内的泌尿器官。肾小管具有渗透外泌体的能力,其形成是多囊 泡体向细胞游离面释放到胞外的历程。本研究效果为水生实验动物泌尿器官的功效研究及相关模子的开发应用涤讪 了形态学基础。
阅读原文:成年斑马鱼体肾的微细结构及其外泌体的漫衍判断.pdf